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多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒50管/24樣

價格
¥540.00

型號
BH-9611403-2

品牌
博湖

所在地
暫無

更新時間
2023-05-26 09:57:06

瀏覽次數(shù)

    產(chǎn)品名稱:多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒50管/24樣
    檢測方法:可見分光光度法
    產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
    產(chǎn)品貨號:BH-9611403-2
    產(chǎn)品分類:光合作用系列

    商品介紹:

    測定意義:

    多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細(xì)胞壁結(jié)合蛋白,可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)解體,導(dǎo)致果實(shí)軟化,與果實(shí)成熟、葉和花的脫落、病原物防御,細(xì)胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān),在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究價值。

    測定原理:

    多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,測定540nm處吸光值變化可計(jì)算得多聚半乳糖醛酸酶活性。

    自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

    天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
    試劑的組成和配制:

    提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

    試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。

    輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣
    產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:

    1、快速簡便:全程約2小時,可測50例左右樣本。

    2、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

    3、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

    4、回收試驗(yàn): X =97%。

    5、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

    6、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織等。

    通用規(guī)則:

    1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

    2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

    3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。

    4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。

    5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

    6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

    7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。

    8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。

    9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

    10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。

    注意事項(xiàng):

    ①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

    ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

    ③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

    ④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

    ⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

    ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

    ⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

    ⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

    ⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

    1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

    樣品的準(zhǔn)備:

    細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:對于貼壁細(xì)胞,吸凈細(xì)胞培養(yǎng)液,用4℃或冰浴預(yù)冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍,按照每100萬細(xì)胞加入100~200μL的比例加入本試劑盒提供的SOD樣品制備液,適當(dāng)吹打以充分裂解細(xì)胞;對于懸浮細(xì)胞,600g離心5分鐘收集細(xì)胞,用4℃或冰浴預(yù)冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍,按照每100萬細(xì)胞加入100~200μL的比例加入SOD樣品制備液,適當(dāng)吹打,以充分裂解細(xì)胞。4℃約12000g離心3~5分鐘,取上清作為待測樣品。

    組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素鈉)灌流清除血液后獲取組織樣品。取適量的組織樣品,按照每10mg組織加入100μL SOD樣品制備液的比例在4℃或冰浴進(jìn)行勻漿(可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器)。4℃約12000g離心3~5分鐘,取上清作為待測樣品。

    血漿或紅細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。4℃ 600g離心10分鐘,移取上清至另一新的1mL離心管中,適量生理鹽水稀釋后即可作為血漿樣本進(jìn)行檢測。紅細(xì)胞樣品可以參考步驟1a懸浮細(xì)胞樣品的制備方法,或其它不含Triton X-100等去垢劑的樣品制備方法。

    上述樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。通常10~20μg蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中的SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考)。每種樣品準(zhǔn)備20~100μg蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

    根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用本試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟組織10%勻漿液(組織和勻漿液的重量比為1:10)上清,通常需要稀釋10~100倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

    公司提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更的產(chǎn)品。

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    DHT(Human Dihydrotestosterone) ELISA Kit  人雙氫睪tong規(guī)格: 48T

    GHRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit  人促生長激su釋放激su規(guī)格: 48T

    PROG(Human Progesterone) ELISA kit  人孕激su/孕tong規(guī)格: 48T

    uE3(Human ultra Estriol) ELISA KIT  人敏游離雌三chun規(guī)格: 48T

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