培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑

英文名稱：K-252B

產(chǎn)品規(guī)格：1mg

發(fā)貨周期：1～3天

我們科研實(shí)驗(yàn)室：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，*將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織完全被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞*；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，*在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

3-炳基十四基二甜菜堿 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR Myristyl sulfobetaine 桿菌屬 Lactobacillus sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

莫地平雜質(zhì)Ⅰ 訂購|咨詢 規(guī)格： 50mg 10號(hào)染色體開放閱讀框93抗體 TRACP ELISA Kit 人抗酒石性酶(TRACP)ELISA試劑盒

4'-酰并-18-冠-6-(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

重樓皂苷 VⅡ  英文名稱：Paris polyphylla saponin V II   保存：-20℃   規(guī)格：10mg 前列腺素E2抗體

敵草隆(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% Diuron 粘蛋白20(MUC20)重組蛋白英文名稱：Recombinant Mucin 20 (MUC20)

蒿 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg ATP6V1B2蛋白抗體 SHH ELISA Kit 音猬因子(SHH)ELISA試劑盒

嗎氯貝胺 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Moclobemide 胞外5'-核苷酶(NT5E)重組蛋白英文名稱：Recombinant 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)

9-氧基喜樹堿 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒人96T6.25-400 nmol/L小鼠碳酐酶1(CA-1)ELISA試劑盒，英文名：CA-1 ELISA Kit

刺玫果  英文名稱：Rosa davurica   保存：-20℃   規(guī)格：1g DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體

菝葜皂苷元;Sarsasapogenin 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg ELISA Kit for Human Platelet-derived growth factor D大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒，英文名：EGF ELISA Kit

柚皮苷二查爾 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Naringin dihydrochalcone 人非小細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱：NCI-H1299

1,6,20,25-四氮雜[6.1.6.1]對(duì)環(huán)芳(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 1,6,20,25-Tetraaza[6.1.6.1]paracyclophane QBC-939, 人膽管細(xì)胞

蘇丹紅G/溶劑紅1/油紅113 質(zhì)量規(guī)格：BS Sudan red G/Solvent Red 1 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)

K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑Paxillin  樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1mlCECR6  貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規(guī)格: 0.2ml 萊苞迪甙C（標(biāo)準(zhǔn)品） Rebaudioside C

S100A4  S100A4抗體 規(guī)格: 0.1ml 鳶尾多糖 Roof Iris Rhizome polysaccharose

TBX2/T-box2  栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑基因) 規(guī)格: 0.2ml 半胱胺鹽鹽 Cysteamine Hydrochloride

Mouse Anti-rat IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml 3-基喃 3-Methylfuran (stabilized with HQ)

L-Selectin/CD62L  L選擇素抗體 規(guī)格: 0.1ml 3-溴基-7-氧基-1,4-并惡嗪-2-(>98.0%(T)) 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one

TMPRSS4  膜型絲氨蛋白酶2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1ml 酰胺 Acetazolamide

Vesicle docking protein p115  囊泡對(duì)接蛋白p115抗體 0.2ml 1-酚 1-Naphthol

FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X  母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 4-基-6,7-亞基二氧代香豆素(>99.0 %(GC)) 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin